- 125
- 45
- Усп. сделок
- N/A
Как сделать волшебный грибной шприц со спорами из спорового отпечатка
Что такое споровый шприц?
Жидкий споровый шприц (раствор спор) — это шприц, наполненный грибными спорами в стерильной воде, необходимой для их увлажнения (регидратации). Это один из самых простых способов переноса спор на стерильный субстрат (инокуляции).Споровый шприц VS жидкая культура
Споровый шприц часто путают с жидкой культурой. Однако жидкая культура (LC) — это результат развития мицелия в жидком питательном бульоне (на основе мёда, кукурузного сиропа, солодового экстракта и др.).Жидкая культура предпочтительнее при инокуляции зернового субстрата, так как мицелий в ней распространяется быстрее. Однако для её создания всё равно сначала нужен споровый шприц.
См. также: Руководство по жидкой культуреLC — это дополнительный, более сложный и длительный этап по сравнению с использованием спорового шприца.
Зачем нужен споровый шприц?
Процесс выращивания грибов имитирует природные условия.В природе, когда гриб раскрывает шляпку, он выпускает споры. Свежие споры жизнеспособны и содержат влагу, но со временем обезвоживаются и "засыпают", ожидая влажного сезона.
Чтобы воссоздать сезон дождей и «разбудить» споры, мы помещаем их в стерильную воду в шприце.
Кроме того, споровый шприц — самый простой и доступный способ инокуляции субстрата, особенно для новичков.
Материалы для приготовления спорового шприца
- Споровый отпечаток в пакете на молнии
- Стерильный одноразовый шприц с иглой (один шприц на один отпечаток спор)
Совет: Используйте шприц объёмом 10–50 мл, чтобы извлечь максимум генетического материала из одного отпечатка (в каждом — миллиарды спор). - Стерильная вода для инъекций (не менее 5 мл на шприц)
Совет: Если у вас нет стерильной воды, прокипятите питьевую воду 10–15 минут, наберите её в шприц и остудите. - Этиловый или изопропиловый спирт (70%) в бутылке или распылителе
Совет: 70% спирт эффективнее более концентрированного, так как проникает в клеточные мембраны, а не испаряется сразу - Ватные диски — 2–3 шт.
- Средства индивидуальной защиты: перчатки, маска, лабораторный халат или полиэтиленовый плащ, шапочка
Подготовка и стерилизация
- Вымойте руки и лицо.
- Наденьте средства индивидуальной защиты.
- Протрите рабочую поверхность спиртом (с помощью ватного диска или распылителя).
- Обработайте спиртом перчатки, руки до локтей и все материалы (вода, шприцы, отпечатки, инструменты, даже бутылку со спиртом).
Не жалейте спирта для стерилизации!
Как сделать споровый шприц
Метод 1: В пакете на молнии (без стерильной коробки)
Этот метод простой и не требует идеальных условий — ни стерильного бокса, ни ламинарного шкафа. Но он требует использовать весь отпечаток спор сразу, что менее экономично.- Откройте ампулу с водой.
- Вставьте иглу в шприц и наберите воду.
- Не открывая пакет со спорами, обработайте его спиртом.
- Проколите угол пакета ближе к клапану, вставьте иглу и выдавите всю воду внутрь.
- Не вынимая иглу, аккуратно потрите отпечаток через пакет — это отделит споры.
- Наберите воду со спорами обратно в шприц.
- Обработайте иглу спиртом, наденьте колпачок.
⚠ Не касайтесь открытой иглой никаких поверхностей! - Встряхните шприц для равномерного распределения спор.
- Оберните фольгой и уберите в тёмное место.
- Подпишите штамм.
- Оставьте шприц на 24–48 часов при комнатной температуре для регидратации.
Как увеличить объём раствора?
Чтобы привить больше субстрата:- Используйте шприц большего объёма (20–50 мл).
- Приготовьте раствор спор, как указано выше.
- Добавьте в шприц ещё 15–40 мл стерильной воды.
- Или разбавьте готовый раствор в стерильных пробирках/контейнерах в SAB или под вытяжкой.
Метод 2: В неподвижной воздушной коробке (SAB)
Позволяет использовать лишь часть отпечатка и сохранить остальное.- Поместите все материалы внутрь SAB:
- Отпечаток спор, шприцы, воду, спирт, ножницы, скальпель, стерильный контейнер
- Протрите всё спиртом.
- Откройте пакет с отпечатком.
- С помощью скальпеля перенесите часть спор в стерильную чашку/контейнер.
- Добавьте воду.
- Наберите раствор в шприц.
- При необходимости добавьте ещё воды, чтобы заполнить шприц.
Хранение спорового шприца
- Срок хранения — до 1 года.
- Хранить можно при комнатной температуре в тёмном месте до месяца.
- Для длительного хранения (>1 месяца): в холодильнике при +2…+8 °C (35–46 °F).
- Встряхивайте шприц каждые 2–4 недели и обязательно перед прививкой.
